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武进农情第15期(总第35期)
发布日期: 2023-11-21    来源:农业农村局  浏览次数:  字号:〖大 中 小〗
 

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【水生动物致病菌对药物感受性检测结果报告】

为帮助执业兽医(水生)科学选择和使用水产用抗菌素类药物,2023年,从常州市武进区人工养殖水生动物体内分离致病菌,测定了其对水产用抗菌素类药物的敏感性,现将结果公告如下。

1 材料与方法

1.1 供试药物

目前我国农业农村部以及国外允许使用的水产用抗菌素类药物(药物种类随国家标准渔药目录修订而变化):恩诺沙星、硫酸新霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、盐酸多西环素、氟甲喹、磺胺间甲氧嘧啶钠(下表简称磺胺嘧啶)、磺胺甲噁唑+甲氧苄啶(下表简称噁唑+苄啶)。

1.2 供试菌株

2023年,从武进区水产养殖户饲养的水生动物体内,分离的各种致病菌(菌株分离时间、地点和病鱼器官等详细情况见表1)。

表1 菌株分离清单表

序号

菌株编号

采样时间

采样地

水生动物种类

分离部位

是否发病

菌株种类

是否药敏检测

1

WJ2301

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼1

腹水

是

维氏气单胞菌

是

2

WJ2302

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼1

肾

是

维氏气单胞菌

是

3

WJ2303

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼2

腹水

是

 

否

4

WJ2304

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼2

肝

是

 

否

5

WJ2305

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼2

肝

是

 

否

6

WJ2306

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼2

肾

是

气单胞菌属

是

7

WJ2307

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼3

肾

是

维氏气单胞菌

是

8

WJ2308

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼3

腹水

是

 

否

9

WJ2309

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼3

腹水

是

维氏气单胞菌

是

10

WJ2310

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼4

腹水

是

维氏气单胞菌

是

11

WJ2311

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼4

肝

是

维氏气单胞菌

是

12

WJ2312

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼5

肝

是

维氏气单胞菌

是

13

WJ2313

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼5

肾

是

维氏气单胞菌

是

14

WJ2314

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼6

肾

是

 

否

15

WJ2315

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼7

肾

是

维氏气单胞菌

是

16

WJ2316

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼8

肾

是

 

否

17

WJ2317

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼8

腹水

是

气单胞菌属

是

18

WJ2318

2023.6.26

嘉泽

鳊鱼9

腹水

是

 

否

19

WJ2319

2023.6.26

洛阳

鲫鱼1

肝

是

维氏气单胞菌

是

20

WJ2320

2023.6.26

洛阳

鲫鱼1

肾

是

 

否

21

WJ2321

2023.7.27

前黄

鳊鱼1

腹水

是

维氏气单胞菌

是

22

WJ2322

2023.7.27

前黄

鳊鱼1

肝

是

维氏气单胞菌

是

23

WJ2323

2023.7.27

前黄

鳊鱼1

肾

是

 

是

24

WJ2324

2023.7.27

前黄

鳊鱼2

肠

是

维氏气单胞菌

是

25

WJ2325

2023.7.27

前黄

鳊鱼2

腹水

是

嗜水气单胞菌

是

26

WJ2326

2023.8.7

前黄

叉尾鮰1

腹水

是

维氏气单胞菌

是

27

WJ2327

2023.8.7

前黄

叉尾鮰2

鳃

是

 

是

28

WJ2328

2023.8.7

前黄

叉尾鮰2

肠

是

 

否

29

WJ2329

2023.8.7

前黄

叉尾鮰2

肾

是

人葡萄球菌

是

30

WJ2330

2023.8.7

前黄

叉尾鮰2

腹水

是

类志贺邻单胞菌

是

31

WJ2331

2023.8.17

洛阳

青鱼1

肾

是

类志贺邻单胞菌

是

32

WJ2332

2023.8.17

洛阳

青鱼2

肝

是

维氏气单胞菌

是

33

WJ2333

2023.8.17

洛阳

青鱼2

腹水

是

维氏气单胞菌

是

1.3 供试菌株最小抑菌浓度的测定

按照日本化学疗法学会制定的标准法,首先将供试药物采用适宜的溶媒溶解后,用灭菌生理盐水分别稀释至1000.0mg/L的浓度。然后在无菌条件下,用灭菌后的液体培养基将药物稀释10倍,从而使培养基中药物的浓度达到100.0mg/L的浓度。再用定量移液枪向每支盛有2.9 mL 胰蛋白胨液体培养基的试管中加入2.9 mL含有药物的培养基,将试管在混悬器上混合均匀后,从中吸取2.9 mL含有药物的胰蛋白胨液体培养基加到下一试管中,以此类推制作成药物浓度分别为100.0mg/L、50.0mg/L、25.0mg/L……0.025mg/L的2倍稀释药物系列培养基试管。最后,定量吸取0.1mL浓度约为1.2×106cfu/mL活菌液(比浊法测定)加入上述每支试管中,摇匀。置于25℃条件下培养72 h,经肉眼观察证实无细菌生长试管中的最低药物浓度,即为药物的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。

本次对以上33株菌株中的24株进行了药敏试验。试验采用南京菲恩医疗科技有限公司提供的药敏板进行,药敏板原理同上,具体操作步骤详见《定制药敏板使用说明》。

2 结果

2.1 维氏气单胞菌对抗菌药物的感受性

维氏气单胞菌是引起水生动物细菌性败血症等疾病的致病细菌。16株维氏气单胞菌对各种抗菌药物感受性测定结果如表2所示。

表2  嗜水气单胞菌对各种抗菌药物的感受性

供试药物

恩诺沙星

药物浓度(mg/L)

16

8

4

2

1

0.5

0.25

0.125

0.06

0.03

0.015

0.008

菌株数(株)

6

1

2

 

3

1

1

1

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

供试药物

硫酸新霉素

药物浓度(mg/L)

256

128

64

32

16

8

4

2

1

0.5

0.25

0.125

菌株数(株)

 

 

 

1

2

2

1

3

3

2

2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

供试药物

甲砜霉素

药物浓度(mg/L)

512

256

128

64

32

16

8

4

2

1

0.5

0.25

菌株数(株)

8

1

 

 

 

 

 

 

 

2

5

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

供试药物

氟苯尼考

药物浓度(mg/L)

512

256

128

64

32

16

8

4

2

1

0.5

0.25

菌株数(株)

5

1

 

1

1

1

 

 

 

 

6

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

供试药物

盐酸多西环素

药物浓度(mg/L)

128

64

32

16

8

4

2

1

0.5

0.25

0.125

0.06

菌株数(株)

 

 

 

4

1

1

3

1

2

3

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

供试药物

氟甲喹

药物浓度(mg/L)

256

128

64

32

16

8

4

2

1

0.5

0.25

0.125

菌株数(株)

 

 

2

7

4

 

 

 

1

2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

供试药物

磺胺嘧啶

药物浓度(mg/L)

1024

512

256

128

64

32

16

8

4

2

菌株数(株)

6

2

1

 

1

1

2

2

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

供试药物

噁唑+苄啶

药物浓度(mg/L)

608/32

304/16

152/8

76/4

38/2

19/1

9.5/0.5

4.8/0.25

2.4/0.12

1.2/0.06

菌株数(株)

4

4

 

1

1

 

4

1

1

 

注:药敏结果超出最大或最小药物浓度范围时,在计算过程中以最大或最小浓度替代。

2.2其他菌

还有8株为其他种类的菌,包括1株人葡萄球菌、1株嗜水气单胞菌菌、2株气单胞菌属、2株类志贺邻单胞菌和2株未知菌株。这8种菌对各种抗菌药物感受性测定结果如表3所示。

表3  8种菌对各种抗菌药物的感受性

供试药物

恩诺沙星

药物浓度(mg/L)

16

8

4

2

1

0.5

0.25

0.125

0.06

0.03

0.015

0.008

菌株数(株)

1

 

 

2

2

1

1

 

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

供试药物

硫酸新霉素

药物浓度(mg/L)

256

128

64

32

16

8

4

2

1

0.5

0.25

0.125

菌株数(株)

 

 

 

 

1

1

 

1

2

 

 

3

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

供试药物

甲砜霉素

药物浓度(mg/L)

512

256

128

64

32

16

8

4

2

1

0.5

0.25

菌株数(株)

1

2

 

 

 

1

 

1

1

2

 

 

 

 

供试药物

氟苯尼考

药物浓度(mg/L)

512

256

128

64

32

16

8

4

2

1

0.5

0.25

菌株数(株)

 

1

 

2

1

 

 

 

2

 

2

 

 

 

供试药物

盐酸多西环素

药物浓度(mg/L)

128

64

32

16

8

4

2

1

0.5

0.25

0.125

0.06

菌株数(株)

 

 

1

 

 

 

 

1

3

1

1

1

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

供试药物

氟甲喹

药物浓度(mg/L)

256

128

64

32

16

8

4

2

1

0.5

0.25

0.125

菌株数(株)

 

 

 

3

1

2

 

 

2

 

 

 

 

 

供试药物

磺胺嘧啶

药物浓度(mg/L)

1024

512

256

128

64

32

16

8

4

2

菌株数(株)

1

 

 

 

2

2

 

2

 

1

 

 

供试药物

噁唑+苄啶

药物浓度(mg/L)

608/32

304/16

152/8

76/4

38/2

19/1

9.5/0.5

4.8/0.25

2.4/0.12

1.2/0.06

菌株数(株)

1

 

2

 

1

 

 

3

 

1

3 分析与建议

2023年,不同养殖户池塘分离的菌株对不同药物敏感程度表现出较大差异,被采集到样本的养殖户可根据自身塘口报告选择用药。没有采集到样本的养殖户可参照上述结果,优先使用大数据分析后得出的普遍较敏感药物,具体如下:

对于养殖户来说,主要分离到的菌株多为维氏气单胞菌,建议首选考虑采用硫酸新霉素和盐酸多西环素进行治疗,不推荐使用甲砜霉素、磺胺嘧啶和噁唑+苄啶三类抗生素。


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