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为帮助执业兽医(水生)科学选择和使用水产用抗菌素类药物,2020年,从武进区人工养殖水生动物体内分离致病菌,测定了其对水产用抗菌素类药物的敏感性,现将结果公告如下。
1材料与方法
1.1供试药物
目前我国农业部以及国外允许使用的水产用抗菌素类药物(药物种类随国家标准渔药目录修订而变化):硫酸新霉素、氟苯尼考、恩诺沙星、甲砜霉素、多西环素、氟甲喹、磺胺间甲氧嘧啶钠(下表简称磺胺嘧啶)、磺胺甲噁唑+甲氧苄啶(下表简称噁唑+苄啶)。
1.2供试菌株
2020年,从武进区水产养殖户饲养的水生动物体内,分离的各种致病菌(菌株分离时间、地点和病鱼器官等详细情况见表1)。
1.3供试菌株最小抑菌浓度的测定
按照日本化学疗法学会制定的标准法,首先将供试药物采用适宜的溶媒溶解后,用灭菌生理盐水分别稀释至1000.0mg/L的浓度。然后在无菌条件下,用灭菌后的液体培养基将药物稀释10倍,从而使培养基中药物的浓度达到100.0mg/L的浓度。再用定量移液枪向每支盛有2.9 mL胰蛋白胨液体培养基的试管中加入2.9 mL含有药物的培养基,将试管在混悬器上混合均匀后,从中吸取2.9 mL含有药物的胰蛋白胨液体培养基加到下一试管中,以此类推制作成药物浓度分别为100.0mg/L、50.0mg/L、25.0mg/L……0.025mg/L的2倍稀释药物系列培养基试管。最后,定量吸取0.1mL浓度约为1.2×106cfu/mL活菌液(比浊法测定)加入上述每支试管中,摇匀。置于25℃条件下培养72 h,经肉眼观察证实无细菌生长试管中的最低药物浓度,即为药物的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。
本次对以上40株菌株中的24株进行了药敏试验。试验采用南京菲恩医疗科技有限公司提供的药敏板进行,药敏板原理同上,具体操作步骤详见《定制药敏板使用说明》。
2结果
2.1嗜水气单胞菌对抗菌药物的感受性
嗜水气单胞菌是引起水生动物细菌性败血症等疾病的致病细菌。12株嗜水气单胞菌对各种抗菌药物感受性测定结果如表2所示。
注:药敏结果超出最大或最小药物浓度范围时,在计算过程中以最大或最小浓度替代。
2.2维氏气单胞菌
维氏气单胞菌也可引起水生动物细菌性败血症等疾病。12株维氏气单胞菌对各种抗菌药物感受性测定结果如表3所示。
表3 维氏气单胞菌对各种抗菌药物的感受性
3分析与建议
药敏结果差异较大,需区别性择药;整体来讲恩诺沙星的敏感性较18、19年有一定恢复,建议养殖户继续停用1年,待敏感性完全恢复后再选择使用;硫酸新霉素和氟苯尼考的药物敏感度有显著下降,尤其是氟苯尼考可考虑今年开始停用1个养殖周期;没有做到药敏的养殖户今年和明年上半年抗生素使用方面建议选择硫酸新霉素和盐酸多西环素。