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【水生动物致病菌对药物感受性检测结果报告】
为帮助执业兽医(水生)科学选择和使用水产用抗菌素类药物,2023年,从常州市武进区人工养殖水生动物体内分离致病菌,测定了其对水产用抗菌素类药物的敏感性,现将结果公告如下。
1 材料与方法
1.1 供试药物
目前我国农业农村部以及国外允许使用的水产用抗菌素类药物(药物种类随国家标准渔药目录修订而变化):恩诺沙星、硫酸新霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、盐酸多西环素、氟甲喹、磺胺间甲氧嘧啶钠(下表简称磺胺嘧啶)、磺胺甲噁唑+甲氧苄啶(下表简称噁唑+苄啶)。
1.2 供试菌株
2023年,从武进区水产养殖户饲养的水生动物体内,分离的各种致病菌(菌株分离时间、地点和病鱼器官等详细情况见表1)。
表1 菌株分离清单表
序号
菌株编号
采样时间
采样地
水生动物种类
分离部位
是否发病
菌株种类
是否药敏检测
1
WJ2301
2023.6.26
嘉泽
鳊鱼1
腹水
是
维氏气单胞菌
2
WJ2302
肾
3
WJ2303
鳊鱼2
否
4
WJ2304
肝
5
WJ2305
6
WJ2306
气单胞菌属
7
WJ2307
鳊鱼3
8
WJ2308
9
WJ2309
10
WJ2310
鳊鱼4
11
WJ2311
12
WJ2312
鳊鱼5
13
WJ2313
14
WJ2314
鳊鱼6
15
WJ2315
鳊鱼7
16
WJ2316
鳊鱼8
17
WJ2317
18
WJ2318
鳊鱼9
19
WJ2319
洛阳
鲫鱼1
20
WJ2320
21
WJ2321
2023.7.27
前黄
22
WJ2322
23
WJ2323
24
WJ2324
肠
25
WJ2325
嗜水气单胞菌
26
WJ2326
2023.8.7
叉尾鮰1
27
WJ2327
叉尾鮰2
鳃
28
WJ2328
29
WJ2329
人葡萄球菌
30
WJ2330
类志贺邻单胞菌
31
WJ2331
2023.8.17
青鱼1
32
WJ2332
青鱼2
33
WJ2333
1.3 供试菌株最小抑菌浓度的测定
按照日本化学疗法学会制定的标准法,首先将供试药物采用适宜的溶媒溶解后,用灭菌生理盐水分别稀释至1000.0mg/L的浓度。然后在无菌条件下,用灭菌后的液体培养基将药物稀释10倍,从而使培养基中药物的浓度达到100.0mg/L的浓度。再用定量移液枪向每支盛有2.9 mL 胰蛋白胨液体培养基的试管中加入2.9 mL含有药物的培养基,将试管在混悬器上混合均匀后,从中吸取2.9 mL含有药物的胰蛋白胨液体培养基加到下一试管中,以此类推制作成药物浓度分别为100.0mg/L、50.0mg/L、25.0mg/L……0.025mg/L的2倍稀释药物系列培养基试管。最后,定量吸取0.1mL浓度约为1.2×106cfu/mL活菌液(比浊法测定)加入上述每支试管中,摇匀。置于25℃条件下培养72 h,经肉眼观察证实无细菌生长试管中的最低药物浓度,即为药物的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。
本次对以上33株菌株中的24株进行了药敏试验。试验采用南京菲恩医疗科技有限公司提供的药敏板进行,药敏板原理同上,具体操作步骤详见《定制药敏板使用说明》。
2 结果
2.1 维氏气单胞菌对抗菌药物的感受性
维氏气单胞菌是引起水生动物细菌性败血症等疾病的致病细菌。16株维氏气单胞菌对各种抗菌药物感受性测定结果如表2所示。
表2 嗜水气单胞菌对各种抗菌药物的感受性
供试药物
恩诺沙星
药物浓度(mg/L)
0.5
0.25
0.125
0.06
0.03
0.015
0.008
菌株数(株)
硫酸新霉素
256
128
64
甲砜霉素
512
氟苯尼考
盐酸多西环素
氟甲喹
磺胺嘧啶
1024
噁唑+苄啶
608/32
304/16
152/8
76/4
38/2
19/1
9.5/0.5
4.8/0.25
2.4/0.12
1.2/0.06
注:药敏结果超出最大或最小药物浓度范围时,在计算过程中以最大或最小浓度替代。
2.2其他菌
还有8株为其他种类的菌,包括1株人葡萄球菌、1株嗜水气单胞菌菌、2株气单胞菌属、2株类志贺邻单胞菌和2株未知菌株。这8种菌对各种抗菌药物感受性测定结果如表3所示。
表3 8种菌对各种抗菌药物的感受性
3 分析与建议
2023年,不同养殖户池塘分离的菌株对不同药物敏感程度表现出较大差异,被采集到样本的养殖户可根据自身塘口报告选择用药。没有采集到样本的养殖户可参照上述结果,优先使用大数据分析后得出的普遍较敏感药物,具体如下:
对于养殖户来说,主要分离到的菌株多为维氏气单胞菌,建议首选考虑采用硫酸新霉素和盐酸多西环素进行治疗,不推荐使用甲砜霉素、磺胺嘧啶和噁唑+苄啶三类抗生素。