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【2022年常州市武进区水生动物致病菌对药物感受性检测结果报告】
为帮助执业兽医(水生)科学选择和使用水产用抗菌素类药物,2022年,从常州市武进区人工养殖水生动物体内分离致病菌,测定了其对水产用抗菌素类药物的敏感性,结果如下。
一、材料与方法
(一)供试药物
目前我国农业农村部以及国外允许使用的水产用抗菌素类药物(药物种类随国家标准渔药目录修订而变化):恩诺沙星、硫酸新霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、盐酸多西环素、氟甲喹、磺胺间甲氧嘧啶钠(下表简称磺胺嘧啶)、磺胺甲噁唑+甲氧苄啶(下表简称噁唑+苄啶)。
(二)供试菌株
2022年,从武进区水产养殖户饲养的水生动物体内,分离的各种致病菌(菌株分离时间、地点和病鱼器官等详细情况见表1)。
表1 菌株分离清单表
序号
菌株编号
采样时间
采样地
水生动物种类
分离部位
是否发病
菌株种类
是否药敏检测
1
WJ22-0520-1
2022.5.20
前黄镇
鳊鱼
肝
是
嗜水气单胞菌
2
WJ22-0520-2
否
3
WJ22-0520-3
肾
4
WJ22-0520-4
5
WJ22-0602-1
2022.6.2
6
WJ22-0602-2
7
WJ22-0609-1
2022.6.9
8
WJ22-0609-2
9
WJ22-0609-3
10
WJ22-0609-4
11
WJ22-0609-5
12
WJ22-0609-6
13
WJ22-0609-7
14
WJ22-0609-8
维氏气单胞菌
15
WJ22-0609-9
产气克莱勃氏杆菌
16
WJ22-0609-10
17
WJ22-0609-11
18
WJ22-0609-12
腹水
19
WJ22-0609-13
20
WJ22-0609-14
21
WJ22-0609-15
22
WJ22-0609-16
中间气单胞菌
23
WJ22-0609-17
24
WJ22-0609-18
巨球菌
25
WJ22-0609-19
鲍氏不动杆菌
26
WJ22-0609-20
神户肠杆菌
27
WJ22-0609-21
28
WJ22-0609-22
29
WJ22-0609-23
30
WJ22-0609-24
31
WJ22-0609-25
32
WJ22-0609-26
33
WJ22-0609-27
34
WJ22-0609-28
35
WJ22-0609-29
36
WJ22-0609-30
37
WJ22-0609-31
38
WJ22-0609-32
腐生葡萄球菌
39
WJ22-0609-33
40
WJ22-0609-34
41
WJ22-0609-35
42
WJ22-0609-36
43
WJ22-0609-37
44
WJ22-0609-38
45
WJ22-0609-39
46
WJ22-0609-40
47
WJ22-0609-41
48
WJ22-0609-42
49
WJ22-0609-43
50
WJ22-0609-44
51
WJ22-0609-45
52
WJ22-0609-46
53
WJ22-0609-47
54
WJ22-0609-48
55
WJ22-0610-1
2022.6.10
56
WJ22-0610-2
57
WJ22-0610-3
58
WJ22-0610-4
59
WJ22-0610-5
60
WJ22-0610-6
61
WJ22-0610-7
62
WJ22-0610-8
63
WJ22-0610-9
64
WJ22-0610-10
65
WJ22-0610-11
66
WJ22-0610-12
67
WJ22-0610-13
68
WJ22-0610-14
69
WJ22-0610-15
70
WJ22-0610-16
71
WJ22-0610-17
72
WJ22-0610-18
73
WJ22-0610-19
74
WJ22-0610-20
75
WJ22-0610-21
76
WJ22-0610-22
77
WJ22-0615-1
2022.6.15
78
WJ22-0615-2
79
WJ22-0630-1
2022.6.30
80
WJ22-0630-2
81
WJ22-0630-3
82
WJ22-0630-4
83
WJ22-0630-5
84
WJ22-0630-6
85
WJ22-0905-1
2022.9.5
86
WJ22-0905-2
87
WJ22-0905-3
88
WJ22-0905-4
89
WJ22-0905-5
90
WJ22-0905-6
(三)供试菌株最小抑菌浓度的测定
按照日本化学疗法学会制定的标准法,首先将供试药物采用适宜的溶媒溶解后,用灭菌生理盐水分别稀释至1000.0mg/L的浓度。然后在无菌条件下,用灭菌后的液体培养基将药物稀释10倍,从而使培养基中药物的浓度达到100.0mg/L的浓度。再用定量移液枪向每支盛有2.9 mL胰蛋白胨液体培养基的试管中加入2.9 mL含有药物的培养基,将试管在混悬器上混合均匀后,从中吸取2.9 mL含有药物的胰蛋白胨液体培养基加到下一试管中,以此类推制作成药物浓度分别为100.0mg/L、50.0mg/L、25.0mg/L、0.025mg/L的2倍稀释药物系列培养基试管。最后,定量吸取0.1mL浓度约为1.2×106cfu/mL活菌液(比浊法测定)加入上述每支试管中,摇匀。置于25℃条件下培养72 h,经肉眼观察证实无细菌生长试管中的最低药物浓度,即为药物的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。
本次对以上90株菌株中的49株进行了药敏试验。试验采用南京菲恩医疗科技有限公司提供的药敏板进行,药敏板原理同上,具体操作步骤详见《定制药敏板使用说明》。
二、结果
(一)嗜水气单胞菌对抗菌药物的感受性
嗜水气单胞菌是引起水生动物细菌性败血症等疾病的致病细菌。41株嗜水气单胞菌对各种抗菌药物感受性测定结果如表2所示。
表2 嗜水气单胞菌对各种抗菌药物的感受性
供试药物
恩诺沙星
药物浓度(mg/L)
0.5
0.25
0.125
0.06
0.03
0.015
0.008
菌株数(株)
硫酸新霉素
256
128
甲砜霉素
512
氟苯尼考
盐酸多西环素
氟甲喹
磺胺嘧啶
1024
噁唑+苄啶
608/32
304/16
152/8
76/4
38/2
19/1
9.5/0.5
4.8/0.25
2.4/0.12
1.2/0.06
注:药敏结果超出最大或最小药物浓度范围时,在计算过程中以最大或最小浓度替代。
(二)其他菌
还有8株为其他种类的菌,包括1株巨球菌、1株产气克莱勃氏杆菌、1株神户肠杆菌、1株腐生葡萄球菌、1株维氏气单胞菌和3株未知菌株。这8种菌对各种抗菌药物感受性测定结果如表3所示。
表3 8种菌对各种抗菌药物的感受性
三、分析与建议
2022年,不同养殖户池塘分离的菌株对不同药物敏感程度表现出较大差异,被采集到样本的养殖户可根据自身塘口报告选择用药。没有采集到样本的养殖户可参照上述结果,优先使用大数据分析后得出的普遍较敏感药物,具体如下:
对于鳊鱼养殖户来说,主要分离到的菌株多为嗜水气单胞菌,建议首选考虑采用硫酸新霉素和盐酸多西环素进行治疗,不推荐使用甲砜霉素、磺胺嘧啶和噁唑+苄啶三类抗生素。